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白蝦陶拉症候群
Taura Syndrome in White Shrimp
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作者: 徐榮彬 彭增發 林文惠 謝明利 黃旭田 洪信雄
詳細內容:
一、 病歷:
    本病例發生於今年元月,位於屏東縣高樹鄉的某陳姓白蝦養殖場,養殖池總面
積一甲,分為三池,共放養140萬尾白蝦(Litopenaeus vannammei),放養時間7週,
當放養6週起蝦隻食慾明顯下降,且連續發生體色改變及死亡,一週內連續累計死亡
率約為5% (70,000/1,400,000)。養殖業者曾投予水質改良劑沸石粉及飼料中添加維
生素及電解質,但疫情都一直未見改善。
   
二、
肉眼病變:
 
1. 外觀:發病蝦隻,外殼黑色斑點增加,觸角及尾扇顏色變紅(圖2)。
2. 剖檢:病蝦剖檢可見蝦隻肌肉呈白色混濁樣(圖1)。
   
三、 組織病變:
    組織切片下可見全身體表、附肢、鰓、消化道之上皮細胞出現多發性壞死。病
灶處細胞核濃縮或核崩解成許多碎片及可見細胞質內包涵體,這些細胞碎片與包涵體
混合在一起,使急性感染期病灶處呈現“胡椒粉狀”或“散彈狀”,成為急性感染期
獨特之病理特徵(圖3, 4)。
   
四、 實驗室檢驗:
 
1. 電子顯微鏡觀察:病材組織經處理後以穿透式電子顯微鏡觀察,可見病毒顆粒,其
直徑為31-32 nm,無封套之二十面體。
2. 聚合連鎖反應(PCR):
 
(1) 反轉錄聚合連鎖反應(RT-PCR):抽取待測蝦隻病灶組織作為RNA模板,反
應過程包括先以42℃ 30分鐘,及94℃ 2分鐘進行反轉錄作用,之後樣品以94℃
20秒、62℃ 20秒及72℃ 30秒重覆做15個循環,最後以72℃ 30秒20℃ 30秒做最
後循環。
(2) 巢式聚合連鎖反應(Nested PCR):反轉錄聚合連鎖反應之產物,再以巢
式聚合連鎖反應增幅。反應過程包括先以94℃ 20秒、60℃ 20秒及72℃ 30秒
重覆做35個循環,最後以72℃ 30秒20℃ 30秒做最後循環。產物保存於4℃。
(3) 最終產物再於2% Agar 中以0.5% TBE溶液中電泳,電壓為100 voltage,並以848
bp、630 bp、333 bp 的DNA ladder 作為DNA參考標準,再以Ethidium Bromide作
為核酸染劑。結果可得分子量284bp之主要病毒核酸片段。
   
五、 診斷:
 

白蝦陶拉症候群(Taura Syndrome in White Shrimp Litopenaeus vannammei; TS)

   
六、  
  1992年於南美洲厄瓜多爾(Ecuador)之養殖白蝦首次發生陶拉症候群(TS),
1994年始證明陶拉症候群乃是由病毒所引起的,之後隨著種蝦與蝦苗買賣之運輸,把
病毒擴散至美洲許多養殖區,實際上在西半球的美洲及夏威夷每個養殖地區都已報告
有陶拉症候群病毒(Taura syndrome virus;TSV)感染,其中以太平洋沿岸的秘魯到
墨西哥的對蝦養殖場都流行本病。臺灣因為從中美洲及夏威夷引進白蝦養殖,於1999
年屏東縣沿海養殖白蝦暴發陶拉症候群,造成屏東沿海養殖白蝦大量死亡。除此之
外,還沒有西半球以外地區的野生和養殖對蝦有TSV感染的報告。
1995年德州及夏威夷等處所發生的白蝦感染陶拉症候群,乃是海鷗的糞便作為
傳播媒介,又因相互殘食感染TSV發病死亡蝦隻而造成暴發流行,研究報告指出若感
染TSV後仍存活下來的蝦隻會終生帶毒。不同的蝦種對TSV感受性不同,如白蝦
(Litopenaeus vannamei)和史密斯對蝦(Litopenaeus schmitti)對此病毒感受性高,而
草蝦( Penaeus monodon)、斑節蝦( Marspenaeus japonicus)、粉紅溝蝦
(Farfantenaeus duoraurm)和褐蝦(Farfantenaeus aztecus)大部份具有抵抗力,而且
從野外取得的白蝦後期幼蟲對TSV較不容易感染。陶拉病引起養殖白蝦之蝦苗、幼蝦
及成蝦累積死亡率從40%至90%不等。
陶拉症候群感染可分為三個階段,即急性感染期、過渡期和慢性期。急性感染
易發生在後期幼苗放養後14至40天,蝦隻呈現明顯攝餌能力下降,游動速度減緩,蝦
隻透明度降低,由於紅色素擴散導致病灶部位呈現紅色色澤,死亡主要發生在脫殼的
過程。蝦子若存活下來則進入慢性期,其病灶處因為有血淋細胞的修復及弧菌的感
染,體表會呈現許多不規則分佈的黑色斑痕,此斑痕會持續終生。病蝦病變主要發生
在表皮、附肢皮下、鰓、驅體後端之尾扇等。
陶拉症候群病毒(TSV)是一種單股小RNA病毒(Picornavirus),病毒直徑31-32
nm,無封套之二十面體,核酸大小約為2.3 kb。主要感染外胚層及中胚層起源的組織
細胞,其中上皮細胞是急性期受侵害最嚴重的組織,而只有在慢性期蝦隻淋巴器官才
其他動物十六
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會感染病毒。白蝦對TSV較敏感,於急性期會出現大量死亡,幸存者經短暫的過渡期
後,進入長時間的慢性感染期,感染蝦隻可能終生帶毒,並且把病毒經水平感染給其
他未經感染的蝦隻。儘管懷疑本病會有垂直感染,但目前還沒有實驗證據顯示母蝦把
TSV傳染給子代蝦苗。
本病需與白斑症候群病毒性疾病(White spot syndrome virus disease;WSSVD)
及傳染性皮下及造血組織壞死病(Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis
virus disease;IHHNVD) 做類症鑑別,白斑症候群病毒(WSSV)是一種雙股DNA
病毒,感染白斑症候群病毒性疾病瀕死蝦隻雖然體表會變淡紅色,但於蝦隻體表尤其
頭胸甲會出現直徑0.5至2.0 mm明顯的白斑,且組織病理切片下,於體表、鰓、消化
道之上皮細胞、造血淋巴組織與神經細胞,可見核內包涵體。傳染性皮下及造血組織
壞死病毒(IHHNV)是已知對蝦病毒中最小的病毒,是一種單股DNA病毒,蝦隻感
染傳染性皮下及造血組織壞死病,會有生長緩慢及體表產生畸形等肉眼病灶,而且組
織病理切片下,於外胚層及中胚層源起的器官組織中,可見核內明顯Cowdry A 型包
涵體,包涵體呈嗜伊紅性,且邊緣常出現光環狀。
本病無有效之治療藥物,必須儘量撈除病死蝦隻,並且改善及維持良好的水
質。此外若要根除TSV的方法,則須要採取消滅感染或帶病毒之蝦群,徹底消毒養殖
池的一切設施,及放養不帶TSV之蝦種或蝦苗,且於養殖期間嚴禁一切可能傳入TSV
的因子。
   
七、 參考文獻:
 
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圖1:白蝦感染TSV剖檢可見蝦隻肌肉呈白色混 濁。               圖2:白蝦感染TSV急性期發病蝦隻,尾扇顏色 明顯變紅。

圖3:發病蝦隻泳足組織病理切片可見上皮細 胞壞死灶。(H& E 染色)。               圖4:發病蝦隻尾扇組織病理切片可見上皮細 胞壞死灶及包涵體,使病灶處呈現“散 彈狀”。( H & E 染色) 

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