家禽流行性感冒核酸疫苗製備亞型特異性抗體之研發
- 內容
家禽流行性感冒(avian influenza; AI)是由正黏液病毒科(Orthomyxoviridae)之A 型流行性感冒病毒(type A influenza virus) 所引起之呼吸道疾病,依據血球凝集素及神經氨酸酶二個表面蛋白可區分16種HA 亞型及9 種NA 亞型。所有16 種HA 亞型病毒均可在水禽類發現,為此病毒之儲主[2] 。 自1878 年Perroncito 首先描述此病後,全球各地陸續發生許多的疫情,其間更有多次高死亡率之大爆發,造成嚴重的經濟損失;而在台灣,雖然於1972年曾發生鴨子之病例,但經謝等於1988~1991 年對於台灣飼養之家禽進行抗體調查及病毒分離的結果,證實在家禽普遍有家禽流行性感冒之抗體存在,並且可分離到許多亞型之病毒株。由於水禽為家禽流行性感冒病毒主要之保毒者,而候鳥每年的遷移會將病毒帶入台灣,因此,在國外陸續發現禽源之H5N1及H9N2 流行性感冒病毒感染人類之事件後,更凸顯出家禽流行性感冒防疫檢疫工作的重要性。家禽流行性感冒病毒HA亞型的區別是利用參考血清進行血球凝集抑制試驗(hemagglutination–inhibition test)當作標準方法[8],藉由亞型特異性抗體抑制病毒封套上之血球凝集素與紅血球表面接受器的交互作用之原理。而目前所使用來製造參考血清之方法通常以活毒或不活化病毒注射雞隻以誘發抗體產生[7],但這種方式所產生之抗體非只針對血球凝集素而是對全病毒所轉譯出的十個蛋白均有抗體反應,若使用在血球凝集抑制試驗會對於結果產生干擾現象[4],在血清亞型的區分上則造成混淆。基於對本地產業之永續經營及公共衛生上對人類所造成之威脅性,建立標準抗血清是診斷實驗室必備之材料[6],故在本試驗中我們嘗試以DNA 疫苗方式接種試驗動物來製備參考抗血清[8],希望利用此方法製備單一蛋白之抗血清以減少多源抗體產生之困擾。