(一)病名及病原：

1.病名：弓蟲病 (Toxoplasmosis)

2.病原：Toxoplasmosis gondii，本病之病原是一種孢子蟲，其發育形態有增殖型 (Tachyzoite) 與囊胞型 (Cyst form 或 Pseudocyst) 兩種。  

(二)疾病簡介：

1.宿主：本蟲寄生於人、鳥類、小白鼠、野鼠、天竺鼠、兔、野生齧齒類、犬、貓、山羊、牛、羊或冷血動物在本省對豬引起之病害甚大。至目前所瞭解弓蟲可引起感受性之動物有 45 種哺乳動物，70 種鳥類，5 種爬蟲類 ( 冷血動物 )。

2.寄生部位：寄生於眼球、腦、心、肺、肝、脾、腎、淋巴結及全身各橫紋肌肉。

3.傳染途徑：

(1) 經口：因吃了沒有煮熟或未煮而帶有本蟲之肉類、雞蛋。

(2) 經由皮膚：屠宰場之獸醫、工人本蟲之陽性者特別多。

(3) 胎盤：豬尤其多。或由哺乳而感染。

(4) 交配或哺乳：精液中有原蟲。( 尚未定論 )。

(5) 昆蟲：由吸血昆蟲為媒介而傳播。

(6) 人工感染可經由口、鼻、創傷、腹腔、腦內、血管內注射均可成立感染。

(7) 貓腸之潰瘍處亦有本蟲存在，且其在某些時期糞便中排出 Oocyst ( 卵囊 ) 造成傳播本病之重要途徑之一。

人類感染弓蟲可分為三種：

(1) 後天性感染：分為急性型及不顯性感染型 ( 絕大數為本型 )。

(2) 先天性感染，由母親傳染給胎兒 ( 即垂直感染 )。

(3) 眼型，即眼睛因感染弓蟲，造成瞎眼。
　　後天性感染弓蟲之途徑可能由於 (1) 攝食污染弓蟲卵囊之食物所致，而該卵囊必須已孢子化才具感染能力，係由貓排泄於糞便中之弓蟲卵囊在外界孢子化而來的。人類由於赤手清理沙箱時由手污染而來，甚至於由於蒼蠅或其他昆蟲攜帶卵囊污染食物而來。(2) 攝食感染有弓蟲囊胞的肉而來，例如吃未煮熟的肉類 ( 牛、羊、豬肉等 )。(3) 牛乳。(4) 雞肉或蛋亦有可能。除此之外尚可能由於：(1) 器官移植 ( 因被移植的器官組織含有弓蟲 ) 。(2) 輸血。(3)實驗室弓蟲研究者。(4) 吸血昆蟲 ( 自有蟲血症的感染弓蟲動物吸血傳染給健康的動物 )。  

(三)典型之臨床症狀及病理變化： 　　

絕大數感染者為不顯性感染，臨床症狀可能呈現微熱、不適感、淋巴腺腫，尤以頸部淋巴腺會腫大。另有少數有呈現心肌炎、腦炎、視網膜脈絡膜炎或亦有壞死性肺炎者。
　　急性型之感染者在後天性免疫缺乏症 (AIDS) 病人會呈現全身性感染而造成心肌炎，腦炎或波及肺、肝、腎上腺、肌肉、胰或其他內臟器官之局部性感染等。又 AIDS 病人受弓蟲病感染後往往會有複加重疊感染之現象，例如常見者有細胞巨大病毒 (Cytomegalovirus) 或 Herpes simplex 病毒等感染之現象。
　　至於先天性感染係由於增殖型弓蟲透過胎盤侵入胎兒所致，尤以第一胎為甚，約有 10% 左右先天性感染結果造成流產、死產或胎兒中樞神經受到傷害，如此之傷害通常在懷孕初期時出現上述之病變之頻率較多，惟對新生兒造成視網膜脈絡膜炎、腦壞死病灶、巨肝症及水腦症均有可能發生。  

(四)應採病材：

 　　血清、病變組織 ( 肺、淋巴結、橫膈膜之肌質部、胎盤、腦 )。  

(五)綜合診斷： 　　

弓蟲檢查法中最正確者係以直接檢出弓蟲蟲體，次為檢查其特異性之抗體，但檢出抗體時，則以檢出其特異性的 IgM 才具有臨床上之意義，因 IgM 為感染之後最先出現之抗體檢出非 IgM 之抗體，例如檢出 IgG 時，則診斷之結果係來自三種可能性：

1. 該動物已耐過或治癒後抗體常留存於血流中。

2. 經過特異性抗原免疫結果所產生之抗體，尤其免疫後之中、後期所出現的抗體。

3. 其正由於感染弓蟲而產生之抗體。最常見者以檢出 IgG 抗體，但既使 IgG 抗體力價為陽性，其診斷正確率僅為 33.3% ( 因只是上述三種情況之一而已 )。  

(六)確診依據： 

1.確診：即該動物確實感染弓蟲而致病者，診斷方法應為：
(1)弓蟲體之直接證明或弓蟲體之檢出。

(2)IgM-ELISA, IgM-IFA，免疫化學染色法。

(3)色素試驗，上述 (2) 以外其他血清學檢查方法對於間隔數天的同一動物的配對血清 (Pair-Sera) 的血清學力價有顯著上升者。今以直接凝集試驗可代替色素試驗，因兩者診斷效率相近。

2.輔助診斷：所有一切非 IgM 抗體檢出之血清學檢查之方法均可用於輔助診斷，即可為臨床診斷上之參考而已，不能用於確診。

  (七)參考文獻： 

1.Leman, AD., BE straw., WL mengeling., SD Allaire and DJ Taylor, 1992 , Disease of Swine, Wolfe Publishing Ltd. 7 th ed.t.on P401~408.。  

(八)附錄：

1.弓蟲之蟲體直接證明法：
　　可疑動物經病理解剖後取其肺、肺門淋巴腺、肝、脾等器官，以臟器壓捺法 (stamp smear)，即切取上述之臟器一小塊，然後以夾子固定該小塊之器官於載玻片上輕輕塗抹做成塗抹片，等乾後即可用 Wright's 染色之 ( 或用 Giemsa's 法或 Liu's 法亦可 )；染色後觀察有無增殖型弓蟲體 (trophozoite 或 tachyzoites) 存在。

2.動物接種法：

(1)材料來源 ( 以豬為例 )：取豬屠體之腦或橫膈膜肌質部肌肉。

(2)方法：將上述 (1) 之臟器以剪刀剪得很細碎，然後做成 10 倍的生理鹽水乳劑 (Emulsion)－> 3000xg，15~30 分鐘－> 棄上清液－取沈渣並加小量適量的抗生素 ( 每 ml 加 100 單位青黴素及 100μg 鏈黴素 )－> 接種每隻小白鼠 ( 體重約 18~24克者 ) 以腹腔注射 (I.P.)0.2~0.5ml－> 觀察至少 1 個月，視其有無腹水 ( 發病 )，若有腹水時，則以注射器抽取腹水－> 將腹水做成塗抹片以 Wright's( 或 Liu's Giemsa's stain)－> 顯微鏡下放大至 1000 倍觀察是否有增殖型弓蟲之蟲體存在。若有發現弓蟲體時則該檢體即是被弓蟲所感染者，若被接種之小白鼠不發病且無腹水，則將此小白鼠解剖其肝、腦、肺做成 10 倍生理食鹽水乳劑－> 3000xg，15~30 分鐘－> 棄上清液取沈渣再如上述之方法接種小白鼠一次至二次，若均無腹水及任何弓蟲體被發現，則可診斷該檢體無感染弓蟲。

(3)直接凝集試驗 (Direct Agglutination Test, DA)：
1.抗原：每μ l 的鹼性緩衝溶液 (Alkaline Buffer) 中含有二萬至十萬隻弓蟲 Tachyzoite。

鹼性緩衝溶液之配製：

7.02 克NaCl3.09 克H₃　BO₃2.4ml1N 的 NaOH4 克Bovine Plasma Albumin(Fraction V)14ml2-mercaptoethanol

2.血清：
a.被檢動物血清 ( 非化與否均不影響檢查結果 )。b.陽性血清：以工感染弓蟲動物 ( 如兔 ) 血清。c.陰性血清：SPF 或正常動物血清3.方法：( 採用 U 型 96 孔平盤 )
a.以 2 倍稀釋方法用上述之鹼性緩衝溶液將被檢血清稀釋之，每孔內含有 50μl。b.加 50μl 的弓蟲懸浮液 ( 加上述 1. 抗原所述 )。c.置 37℃ 定溫箱隔夜，即可判讀。
陽性：血清力價 20x 以上者 ( 含 20x)
陰性：血清力價 20x 以下者。4.免疫化學染色法：最常用者為 ABC 法 (Avidin-biotin complex Method) 或 PAP 法 (Peroxidase Anti-peroxidase Method) 適用於一般組織病理切片之染色或冷凍切片之檢測，其目的是檢出弓蟲體 ( 抗原 )，其效果遠優於 H.E. 染色，因為免疫化學染色法容易辨識，因此，檢出效果頗為理想。
免疫過氧化氫－ ABC 法
操作手續如下：然後再移入 4℃ 冰箱靜置 1 小時後以前述之洗滌液洗滌 3 次，再在所有的洞皆加入 100μl 標示抗體 ( 以力價檢定時 OD 值 =1.0 之稀釋倍數 ) 後在室溫振盪 5 分鐘後再置 25 分鐘，再移入 4℃ 過夜感作。第二天以洗滌液洗滌 5 次後，每個洞添加 50μl 受質溶液 [ 每 50ml 含 20mg Ophenylendiamine 及 100μl 3%H₂O₂ 之枸椽緩衝液 (citrate buffer)(pH4.7)]，經在室溫於暗室中感作 20 分鐘後每洞加入 50μl 3N H₂SO₄ 中止酵素作用。然後以 ELISA 用判讀機  (Microplate Reader) 在 490nm 之波長判讀每個洞之 OD 值，供試血清之 OD 值如大於或等於陰性血清之平均 OD 值的 3 倍值則判定為陽性。

1.製作石蠟切片，厚 4~8 μm。

2.脫蠟，既將上述切片浸於 100% xylene 中，10 分鐘 /次，2 次。

3.將切片水化。方法為：100% 乙醇，10 分/次，2 次。