加州乳房炎測試法
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係一種利用界面活性劑,如 alkyl aryl sulfonate 之鈉鹽或鉀鹽等,使細胞放出 DNA 後而產生凝集者,試液並加 bromcresol purple (BCP)為 pH 指示劑,在日本則把指示劑改用 Brom-thymol blue (BTB)。
試液:為 3% 之 alkyl aryl sulfonate 之鈉鹽或鉀鹽 (使用Sodium Dodecylbenzenesulfonate),添加0.01% 之 BCP或 BTB,修正 pH 為 7.0 - 7.5。
使用方法:由各拭淨之乳房,各取乳液 2 ml 放於四孔反應盤中,各加等量之試液,搖動反應盤混合約 1 分鐘後判定。
CMT 之判定標準
凝集
等級細胞數
(萬/ml)反應之狀況 色調
等級PH範圍 呈色 一 8.8 無凝集片,於傾面,牛乳保持流動狀態,無性狀變化 一 6.2-
-6.5黃色 士 35.0 可見稍微之凝集,但短時間內又再溶化,牛乳保持流動狀態 士 6.6 淡黃綠色 十 92.1 可見明顯之凝集,於傾面,可見殘留之凝集片 十 6.6-
-6.8黃綠色 廾 207.1 多量凝集塊,粘膠狀稍為強 廾 6.8-
-7.0綠色 卅 376.1 多量凝集塊,形成強粘膠狀之半凝塊狀 卅 7.2-
7.4深綠色 卌 多數量 呈完全凝塊狀 卌 >7.6 藍色 綜合判定
凝集 色調 乳房炎判定 一 一 ~ 士 陰性 一
士十 以上
一 ~ 士7-10日後再檢,若同結果:陰性 士 十 以上 疑陽性 十 一 ~ 士 疑陽性 十 十 以上 乳房炎 廾以上 一 ~ 士 乳房炎 廾以上 十 以上 乳房炎 CMT 試液泡製標準書
試泡製 120,000 ml 量
1. 取蒸餾水或精製水 120,000 ml。 2. 加入 3% 之Sodium Dodecylbenzenesulfonate (3600gm ) 放入使溶,約需 1-3天,注意勿激烈用力攪動,以免起泡。 3. 添加0.01% 之指示劑:取 Bromo-thymol blue (BTB) Sodium salt 12 gm,溶於 120ml 之水中 (若使用非鈉鹽之 BTB,則應溶於 120ml之酒精中)。 4. 調整酸鹼度:3 液加約 5-10 ml 於 2 液中後,取出 2000 ml 之 2 液,以 1 N NaOH 液定量調整 pH 於 7.0-7.4 間,使呈深綠色,再計算所用之液量 (約 11 ml)。 5. 依所使用之1 N NaOH 液量,計算總 2 液量所需之1 N NaOH 液量 (約需 660ml,即 26.4gm 之 NaOH;切勿一下子全部加入,先加 600-620ml,餘量再以每次10ml,試加及觀察呈色並調整之如後),加入 2 液中,再取 2000 ml,觀測其呈色及測pH ,是否於 7.0-7.4 之間,否則再測及調整,直到呈色及pH 均於 7.0-7.4 之間為止。 6. 加入其餘之指示劑,混合後即成。 7. 必要時,全液以濾紙濾清雜質。