工作報告:豬瘟野外毒及疫苗毒之區別診斷技術
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豬瘟 (Classical swine fever or Hog cholera) 是由豬瘟病毒所引起的一種高度傳染性敗血症,以全身性出血為主徵,感染率與死亡率均高達95%至100%。豬瘟病毒(Classical swine fever virus;CSFV)目前已歸類於黃病毒科(Flaviviridae)之瘟疫病毒屬(Pestivirus),與同屬之牛病毒性下痢病毒(Bovine viral diarrhea virus;BVDV)和Border disease virus (BDV)具有共同的抗原性。
目前全省豬隻全面施用LPC活毒疫苗免疫注射來防治豬瘟,LPC活毒疫苗可在豬隻體內存活16天之久。當豬場進行例行性免疫注射LPC活毒疫苗後,數週內發生疑似豬瘟病例,會將病材送往實驗室進行豬瘟確診,由於現行病毒分離,螢光標識抗體染色法及RT-PCR皆難以區別豬瘟野外毒與LPC疫苗毒,因而常造成實驗室診斷上的困難。針對此一難題,本試驗設計特殊引子,以RT-PCR方式增幅送檢病材,從電泳膠片中RT-PCR產物之大小直接判定豬瘟野外毒或LPC疫苗毒。
此外本試驗更發展豬瘟病毒之DNA晶片診斷技術,利用Single tube multiplex PCR方法增幅病毒核酸,再從引子增幅區間內依據各病毒特異性核酸序列設計探針並墨點到塑膠材質之晶片上,藉由Multiplex PCR及核酸雜交技術達到區別豬瘟病毒本土型、外來型、LPC疫苗毒型及牛病毒性下痢病毒之目標。