豬隻口蹄疫疫苗多次免疫產生非結構蛋白抗體之分析
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三種豬型口蹄疫 (Foot and mouth disease;FMD) 病毒非結構蛋白 (NSP) 抗體檢測套組,分別為UBI NSP(3B)、DVIVR NSP(3AB)及CHIKIT NSP(3ABC) 等酵素連結免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay;ELISA)以及病毒中和抗體(Virus neutralization test;VNT)為本試驗採用之分析法。本試驗之主要研究目的為比較五種市售O / TAW / 97商品化不活化疫苗 (A, B, C, D, E) 之使用與NSP抗體產生的關係,藉以評估三種商品化檢驗試劑之適用性及多次免疫對於非結構蛋白抗體之影響。結果顯示多次免疫1~4次的豬隻出現非結構蛋白抗體之陽性率與五種市售不活化疫苗產生的病毒中和抗體幾何平均力價(SN50 geomean titer)呈正相關性。各組疫苗所產生之病毒中和抗體力價高低為 D>B>E>C>A,然同樣發現以UBI Kit 檢測各組疫苗之非結構蛋白抗體所得的陽性率表現亦同於D>B>E>C>A之結果,另DVIVR及CHIKIT疫苗之陽性率高低分別為C >D>B=E>A;B>E>C>D>A,結果顯示疫苗中和抗體力價表現佳者,其出現NSP陽性機率較高,反之為低。其次以UBI Kit 檢測陽性率結果評估免疫次數之間的相關性發現免疫一次與免疫二、 三、 四次有極顯著差異 (p=0.01),而免疫二次與三次及四次比較結果並無顯著差異(p>0.05)。這些結果發現NSP抗體會隨免疫次數的增加而出現偽陽性的比例愈高。另二組DVIVR及CHIKIT ELISA Kits之檢測結果於免疫次數之多少並無顯著差異 (p>0.05)。再進一步比較UBI與DVIVR及CHIKIT kits之陽性率(35%、6%、19%,各別的),呈現DVIVR與其他兩種Kits有極顯著差異(p=0.01),此結果証實NSP抗體與檢驗試劑之特異性及敏感性有關,因為DVIVR kit之高特異性低敏感性,比其他二種kit檢出陽性率相較之下低很多,而UBI與CHIKIT kit檢出陽性率間亦有顯著不同 (p=0.05)。故ELISA檢驗套組檢出陽性率之結果為UBI>CHIKIT>>>DVIVR。由試驗結果證實嘗試使用ELISA檢驗套組從田間多次免疫的動物以篩選自然感染者,在判定上頗有困擾。