五、牛流行熱
- 內容
(一)病名及病原
1.病名:牛流行熱 (Bovine Ephemeral Fever)。
2.病原:係由桿狀病毒 (Rabdovirus) 所引起。
(二)疾病簡介
牛流行熱是由桿病毒科 (Rabdoviridae) 所引起,為非接觸性,而由節肢動物媒介之急性傳染病,呈一短暫的高熱 (40-42℃)、精神沉鬱、呼吸急促、四肢僵硬及跛足等症狀,而造成死亡或淘汰、流產、產乳量下降、治療費用極高及治療殘留抗生素乳的廢棄等經濟損失。本病於 1906 年南非首次發表,但本病早在 1867 年在非洲就曾經記載發生過,本病現存在的國家有非洲、亞洲、澳洲及日本等熱帶、亞洲帶國家。本病屬於桿狀病毒 (Rabdoviridae )的單股 RNA 病毒,病毒顆粒呈子彈形,直徑 70-80nm,長 90-180nm,有的呈 185×75nm 之圓錐型或粒子的病毒,由筆者於 1984 年首次在臺灣分離病毒成功。
1983 年 10 月至 1984 年 9 月期間在臺灣調查之發生率 17.7%,致死及淘汰率為 6.5%。據林朝舜 (1967) 調查當年之發生狀況;即民國 56 年 3 月,本病突然發生於高雄縣,然向北蔓延,至 7 月上旬遠播至台北地區,到 10 月才結束。其間發病頭數為 1183 頭,佔調查頭數 4441 頭之 26.6%,死亡 45 頭,淘汰 17 頭;共計 62 頭,佔發病頭數之 5.24%。其中流死產有 31 頭,以懷孕早期之 3-4 月齡及手孕末期之 7 個月齡居多。 1983 年 10 月間,本病在嘉義市初次發生,然後擴及至鄰近縣市,如嘉義縣、彰化縣、台南縣市、高雄縣及苗栗縣。至 12 月底一度消失之後,又於 1984 年 3 月,以嘉義縣為中心,迅蔓延南下至台南縣、高雄縣、屏東等地區大肆流,然後北移至雲林、彰化、台中、及北部地區。據調查感染動物有乳牛、黃牛、水牛,甚至鹿也有類似病例。
因本病不會同居感染,因此被壞疑本病是否由吸血昆虫所傳播,據 Key(1975) 及 Standfast 等 (1973) 以試驗証實本病毒會在蚊子或糠蠓內增殖,Davis 及 Walker(1974) 在肯亞從糠蠓及 St. George(1976) 在澳洲從蚊子身上分離到本病毒,由此顯示本病的傳播與吸血昆虫有關。又據 Murray(1970) 報告,本病傳播之方向與風向極一致,而主張本病之發生,係由帶毒之吸血昆虫乘風傳播而成為感染源。
(三)典型之臨床症狀及病理變化
本病為一種急性熱性傳染病,經過 3-8 日的潛伏期後會呈現一短暫性發熱,且出現呼吸器障礙,有時併發消化器及四肢關節的異常等症狀。初發病時,在發熱前常見皮肌 ( 如背肌、後軀幹肌 ) 有寒慄,如輕症時不易發覺。發熱為本病必有症狀,體溫會突然升高 41-42℃,稽留 1-2 天,最長 3-4 天後就會下降。在發熱同時眼精流淚,間瞼附著分泌物,結膜充血及浮腫,鼻鏡呈乾燥狀態。呼吸器障為本病之特徵,突然發熱,呼吸急促,呼吸數增加 (70-110次/ 分 ),有些病牛因呼吸困難而伸出舌頭呈開口呼吸,病牛呻吟呈現苦悶狀,而發生肺氣腫,因氣管分泌多量泡沫性粘液所致。如病情較嚴重時會導致窒息死亡。
病牛自咽喉頭及支氣管發出極為粗厲呼吸音,從遠處也能聽到此種異常之呼吸音。肺部聽診有高調尖銳肺泡音,並有咳嗽。其發病後食慾不振或廢絕,反芻停止,至退熱後才恢復正常。第一骨停止蠕動,因骨鼓脹或缺乏水份致骨內容乾固,有些病牛腸之蠕動亢進,也有停止蠕動者,糞便如羊糞呈便秘,亦有排泄軟便及下痢便。
大部份病牛因四肢關節浮腫及疼痛而引起跛行或不能起立,屈膝而倒臥地面。泌乳牛常因發熱而致乳量銳減,有時泌乳停止,且因為治療時使用抗生素致要恢復正常供應乳約須一個月之久,經濟損失極大。其它尚有皮溫不整、角根、耳翼、肢端厥冷亦為本病的早期症狀,此可供本病早期診斷之參考。病牛鼻鏡雖乾燥,病牛不斷流出水樣鼻液、鼻翼擴張、粘膜潮紅,又因口內發炎,流涎甚劇而致口角周圍附著多量泡沫。尿液因發熱而減少,並排出呈混濁尿液。壞孕母牛因發熱或較嚴重者,則發生死流產的情形。
本病病變主要於肺臟及上呼吸道。在短期間內死亡之病例 ( 急性肺氣腫而窒息死亡 ) 可見咽喉頭及氣管等上呼吸道粘膜呈現充出血。肺腫大退縮不全 ( 不能伸縮 ),肺含多量氣體,呈間質性氣腫,較顯著病例形成如一大氣囊,氣腫有時波及橫膈膜,頸部、下腹部之肌間或皮下。肺也會出現水腫及充血,各肺小葉實質可見局限性暗紅色,如斑狀之肝變病灶。支氣管充滿黃白色黏液。心外膜針頭大至栗粒大出血點。肝、脾、胃等實質臟器有輕度腫脹及小壞死灶。消化道並無顯著病變,但粘膜有時可見充出血,尤其在第四胃、盲腸粘膜有漏出性出血。淋巴節呈腫大,腦呈充血並有水腫性病變,關節囊內黃色關節液增加。
(四)應採病材
病材應採發病牛集的抗凝血液 ( 添加肝素或是脫纖血 ),然後以高壓滅菌過的PBS處理病牛的加抗凝劑全血,血液先經 2000rpm 離心 5 分鐘,分離出血球液及血漿,經分別收集血漿後,血球液部份再經 PBS 清洗 3 次後,以 PBS 還原為原來全血容積,再置入 -80℃ 冷凍保存供病毒分離用。若有發病牛經剖檢後也採集其各臟器製成 10 倍乳劑,經低溫離心後取上清液保存,供病毒分離用。
(五)綜合診斷
1.牛流行熱病毒之分離與同定 病毒分離之診斷以接種細胞形成細胞病變 (CPE) 的上清液,或是以出生一日齡小老鼠腦內接種後的腦乳劑上清液進行電子顯微鏡檢查有無病毒顆粒。病材的分離往往須經過 2 至 3 次繼代才會顯現病毒增殖的病變。2.血清學診斷牛流行熱的血清學診斷方法以中和試驗為主,將牛隻發病時的血清採集後,經過 10 至 15 天再採集發病牛隻血清,進行中和試驗檢查,以中和抗體力價升高4倍以上判定為牛隻感染牛流行熱。中和試驗的方法簡介如下:測試中和抗體之前先要準備一批試驗用病毒,測試其病毒力價,然後小分裝保存於 -80℃ 冰箱中,待每次作中和試驗時取出稀釋使用。受測試的血清必須先經非化 ( 在 56℃ 水浴槽浸置 30 分鐘 ),以去除非特異反應因子。取血清 0.05ml 和稀釋液 (MEM)0.05ml 混合在無菌平底培養盤上做兩倍序列連續稀釋,並對每一個稀釋倍數做 4 個重覆,然後加入 0.05ml( 含 200TCID) 的病毒液,經震盪混合均勻後,再送入 37℃ 5% CO2 之恆溫箱進行感作 1 小時。經感作後加入 0.1ml 含 3×105 個細胞的細胞懸浮液,並震盪混合均勻,受以透明膠帶封住,置入恆溫箱培養觀察。經觀察 7 天以形成單層細胞但未產生細胞病變的最高稀釋倍數換算為血清中和抗體力價。並以抗體力價大於或等於 2 倍而判定為牛流行熱抗體陽性。3.病理學診斷牛流行熱感染之牛集病理學變化,主要在肺臟呈明顯之肺氣腫變化,在急性期感染過的牛隻於耐過後可在四肢有關節炎的病理變化。(六)確診依據
目前本病的診斷依據是以病牛的病毒分離為主,尤其牛隻在呈現體溫上升時的病毒分離率較高。而發生牛群的中和抗體反應也可為診斷依據。
(七)參考文獻
1.邱仕炎、呂榮修 (1987) 牛流行預防的研究 中華民國獸醫學會雜誌,13:189-185.2.呂榮修、李永林、黃士則、蔡向榮、廖永剛、林地發、曾俊憲、邱仕炎 (1992 )1989 年發生在臺灣的牛流行熱疫學研究。臺灣畜牧獸醫學會會報,60:51-56.3.Chiu S.Y. and Lu Y.S.(1987) The epidemiology of bovine ephemeral fever in Taiwan 1984. J. Chinese Soc. Vet Sci., 13:1-9.4.Davis S.S., Gibson D.S. and Clark R. (1984) The effect of bovine ephermal fever on milk production. Aust. Vet. J., 61:128.5.St. George T.D(1985) Studies on the pathogenesis of bovine ephemeral fever in sentinel cattel. I. Virology and serology Vet. Microbiol., 10:493-499.6.St. George. T.D. and Standfast H.A. (1988)Bovine ephemeral fever. In:Thomas P. Monath(Ed.) The Arboviruses: Epidemiology and Ecology Vol. Ⅱ Chapter 17, CRC Press, Inc, Florida, U.S.A pp.71-86.