十七、豬傳染性胃腸炎
- 內容
(一)病名及病原
1.病名：豬傳染性胃腸炎
2.病原：冠狀病毒 ( 豬傳染性胃腸帶病毒 )
(二)疾病簡介
TGE 造成仔豬急性下痢或嘔吐，時常是初生仔豬死亡的原因之一，母豬若未事先免疫過，TGE 所造成仔豬的死亡可高達 100%，最近幾年台灣的 TGE 情況似乎不若以往嚴重或與另一株 TGEV 的變異種 PRCV 可能也存在台灣有關或是此病也漸成地區性的疾病，母豬多少都有移形抗體經初乳傳給仔豬，而使此病的致病力不似以往那麼嚴重。
(三)典型之臨床症狀及病理變化
典型的臨床症狀包括；短暫的嘔吐，伴隨著黃色樣下痢，體重迅速下降、脫水、糞便帶有未消化之凝固乳塊，且有惡臭，兩週齡以下的仔豬發病率高，死亡率幾乎百分之百。症狀之嚴重性，疾病之久暫及死亡率與豬隻年齡成反比，一週齡以下的仔豬在症狀出現後的二至七天內死亡，三週齡以下的哺乳豬會存活，但持續瘦弱一段時間。在肥育豬、成豬及母豬，其症狀僅限於食慾不佳，數天的下痢及偶而的嘔吐，某些母豬病後極度衰弱，伴隨著高燒、乳汁缺乏、嘔吐、食慾不振及下痢，這些症狀可能是因與罹病仔豬密切接觸，而過度露在病毒下所致。相反地，沒有與病豬接觸的母豬，只有輕微，甚至沒症狀。
病變通常只限於消化道的胃及腸，在感三天以內死亡的豬中，有 50% 在胃橫隔膜面的憩室部粘膜下有局部出血，小腸膨脹並有黃色泡沫液體及未消化之凝固乳塊，小腸壁可能由於絨色萎縮而變薄，幾乎呈透明狀。豬感染 TGEV 的主要病變為因小腸上皮細胞壞死而引起的絨毛萎縮，其程度端視小腸部位，豬齡、病期及病毒病原性而不同。絨毛萎縮以空腸中段最顯著，而在十二指腸前端則幾乎不能見到萎縮現象。
(四)應採病材
1. 下痢糞便。
2. 小腸。(五)綜合診斷
1.病原分離及同定：
檢體通常是糞便或感染部位的小腸，因病毒對熱不穩定，必須新鮮採樣或低溫保存樣品。首先檢體在 PBS(pH7.4) 下均質化成 10% 懸浮液 ( 此液可於室溫下，以日光直射三十分鐘而不變質 )。將懸浮液以超音波振盪，再以低遠離心，抽取上清液，加入等體積經熱去活化的牛血清，以降低檢體本身的細胞毒性。以此溶液即可接種在有感受性的組織細胞，例如三或四日齡的初代豬腎單層細胞等。在 37℃ 接種一小時後，細胞即覆以含碳酸鈉、抗生素及 1% 胎牛血清之培養液，如 Earle's yeast lactalbumin(EYL) 平衡鹽溶液，控制組也要同時建立，通常細胞病變效應可再三至七天內觀察到，其特徵有細胞圓形及膨大，形成融合細胞，細胞也會剝離，病毒斑形成易判讀，且可信度高。最後確診得將有 CPE 的細胞與抗 TGEV 的特異血清或單株抗體作螢光染色以決定 CPE 是否由 TGEV 造成。
2.血清學診斷：
中和抗體試驗為目前最穩定、可靠且易於大量操作的唯一方法，許多細胞株 ( 如 ST 細胞株 ) 或病毒株均可以使用，使用 96 孔平底培養盤，血清必須未溶血、無菌、且以 56℃、30 分不活化、血清以 1：2 及 1：4 稀釋作 2 組重覆，再加入等量之 2 log10 TCID50 之病毒在 37℃ 下作用 1 小時，然後再加入 100μ1 的 ST 細胞，3~7 天後觀察結果，每一組重覆只要有 50% 的細胞沒有 CPE 顯示有保護即為具中和抗體，確切的力價則於初次力價測定有抗體者一步以高倍稀釋測定之。
3.病理學診斷：
此法系鑑定小腸冷凍切片上病毒抗原的技術，其優點為省時，敏感度佳，且具特異性。檢體為剛不久的豬，最理想的是不超過四週齡，且剛開始要出現臨床病徵的動物 ( 即感染後的 24 至 48 小時之間 )；豬死後的三十分鐘內，即分從小腸後半段四個不同區域各取出約兩公分的小腸為材料。切片經 Tris 緩衝液，沖洗後，以適當稀釋之 FITC 抗 TGEV 抗體溶液染色，以對照組來評估染色效果，正確的解釋要靠絨毛結構是否保持完整而定，上皮細胞則檢視其細胞質內螢光。
(六)診斷依據
下痢糞便電子顯微鏡檢查若能觀察到冠狀病毒可初步診斷為冠狀病毒性下痢，其次再由小腸冷凍切片螢光染色做進一步確診，但無法與流行性下痢區分。
豬呼吸道冠狀病毒若有部份侵犯小腸的話亦可以此系統鑑定出來，但目前進一步的分析尚未建立起來。
(七)參考文獻
Mannal of Recommended Diagnostic Technigues and Requirements for Biological products for Lists A & B Diseases Vol 1 1989 B/049-B1053 office International Des Epizooties, pars France.