野外豬瘟病毒人工感染 SPF 豬之試驗(獸醫科技資訊網)

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野外豬瘟病毒人工感染 SPF 豬之試驗

內容

一、

病歷：

　　5 週齡 SPF 豬行肌肉接種野外豬瘟病毒 STT 病毒株，感染後第五天予以剖檢之，臨床上呈嚴重精神沉鬱、高熱 (41.5℃) 、皮膚發紺及後軀麻痺等症狀。

豬瘟病毒：STT ，源自台南縣南化鄉某發生豬瘟病例豬場，其詳細疫情如後：

　　83年台南縣南化鄉某一貫化養豬場，2.5 月齡豬隻發病，臨床上呈下痢、耳翼發紺等症狀，發病率為 200/1200，該場豬瘟免疫方式為 6～8 週齡時免疫一次，該發病豬為自外購入者，自產豬隻皆正常。

二、

肉眼病變：

5.	胃：	胃黏膜全面潮紅出血。
6.	心：	心肌、心外膜及心內膜嚴重出血。

三、

組織病變：

中樞神經系統：

呈輕度非化膿性腦膜腦炎病變。

2.	淋巴結：	髓質部嚴重出血，成熟淋巴球顯著減少，血管內皮細胞及網狀內皮細胞顯著增生。
3.	腎　臟：	局部腎小管上皮細胞腫脹變性、髓質部血管腔內可見小血栓形成，絲球體之微血管叢及鮑氏囊腔周圍可見嗜伊紅性、均質樣血栓形成。

胃：

粘膜面呈瀰漫性出血病變，粘膜下層水腫，可見纖維素性滲出液聚集。

四、

微生物學檢驗：

1. 細菌檢查：

　　採取病豬之肺、肝、脾、腦及膽囊等臟器於 TSA、Mac Conkey 及 DHL 培養基中培養，結果皆為陰性。

2. 血液檢查：

(1)	血球計數：白血球總數為 9300 個 /mm³。
(2)	血液抹片：Wright's stain 染色檢查，白血球呈核左轉現象。

3. 病毒學檢查：

　(1) 細胞培養接種及豬瘟螢光標示抗體染色檢查：

1.	以 MEM 含 10％之小牛血清，X5 之抗生素做 10～20％之脾臟、淋巴結、扁桃腺等乳劑。
2.	取 0.2ml 檢體乳劑於玻璃片培養盤，加入 0.2ml 之 PK-15 細胞浮游液。PK-15 細胞浮游液（ 1×MEM，10％牛胎兒血清，抗生素）4×10⁵ /ml，使用玻璃片培養盤（8 孔），每孔 1cm²。
3.	經 37℃ 培養 48 小時後，甩棄培養液，除去塑膠盤壁，以吹風器吹乾。
4.	經甲醇固定 2 分，再除去甲醇，以 PBS 清洗。
5.	加入豬瘟螢光標示抗體（0.1ml/ 孔），並於 37℃ 染色 30 分。
6.	以 PBS 洗過三次，除去孔間樹脂帶，再滴 50％ Glycerin-PBS 混合液一滴覆蓋玻片。
7.	螢光顯微鏡下判讀豬瘟特異螢光。
8.	陽性者則有幾十個細胞所構成之 Plaque 發螢光。沒有感染之細胞則沒有螢光。

　(2)PCR 診斷：HCV 陽性。

五、

診斷：

豬瘟（Hog Cholera）

六、

討論：

田間病例之發生可能原因：

　　發病豬隻皆為自外購入者，且購入後未即時予補強注射，可能於運輸途中感染，該病毒株經人工感染試驗結果，除脾臟無梗塞之病變外，其他臟器顯現之肉眼及組織病變皆為典型豬瘟病灶，若僅依動物感染試驗結果觀，該病毒株應屬強毒株。

圖1：五週齡 SPF 豬行肌肉接種野外豬瘟病毒 STT 株，感染後第五天，呈後軀麻痺、高熱及皮膚發紺等症狀圖2：胃粘膜呈瀰漫性出血灶。

圖3：腎小管上皮細胞腫脹變性，腎臟皮質部間質組織有血管外紅血球聚集（出血），絲球體之微血管叢及鮑氏囊腔周圍可見嗜伊紅性，均質樣血栓形成。圖4：非化膿性腦炎：小神經膠細胞聚集及淋巴圍管等現象。

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