野外豬瘟病毒人工感染 SPF 豬之試驗(獸醫科技資訊網)

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野外豬瘟病毒人工感染 SPF 豬之試驗

內容

一、

病歷：

　　5 週齡第二代 SPF 豬行鼻口腔內 (IN & IO) 接種 10^6.5 TCID₅₀ 之 S59 株 PK-CL 細胞增殖第三代豬瘟病毒株，於感染後第五天予以剖檢之，試驗豬臨床上除體溫呈高熱 (41.0℃) 外，無明顯症狀。
　　豬瘟病毒：S59 ，源自花蓮縣轄養豬場，罹患豬瘟病例二月齡豬隻之肺臟乳劑，以 PK-CL 細胞分離所得。該場之疫情如下：
　　83 年花蓮縣壽豐鄉某一貫化豬場，全場大、小豬隻皆發病，臨床上典型豬瘟徵兆，剖檢亦可見典型豬瘟病變。該場因受提姆颱風侵襲，忙著災後復建，故 HC 疫苗注射未予施行，約半年後爆發豬瘟。

二、

肉眼病變：

1.	脾　　：	脾輕度梗塞。
2.	淋巴結：	腸間淋巴呈輕度周邊出血灶且鬆軟無力，周圍結締織呈膠樣狀（圖 2 ）。
3.	腎　臟：	腎臟散發點狀出血灶。
4.	膀　胱：	粘膜呈點狀出血（圖 1）。

三、

組織病變：

1.	大　腦：	非化膿性腦炎，腦實質可見輕度淋巴球圍管，血管內皮細胞增生及小神經膠細胞增生等病變（圖 3）。
2.	脾　臟：	局部梗塞，血管內皮細胞增生，脾小結周圍成熟淋巴球顯著減少，而改由網狀內皮細胞所取代。
3.	淋巴結：	成熟淋巴球顯著減少，髓質部可見少量嗜酸性球浸潤（圖 4）。

四、

微生物檢驗：

細菌檢查：

採取病豬之肺、肝、脾、腦及膽囊等臟器於 TSA、Mac Conkey 及 DHL 培養基中培養，結果皆為陰性。

血液檢查：
(1)血球計數：白血球總數為 8500 個 /mm³。
(2)血液抹片：Wright's stain 染色檢查，白血球呈核左轉現象。

病毒學檢查：

(1)	病毒分離：試驗豬隻之各組織臟器，以含有 2％ FCS 之 EMEM 培養液做成 X10 乳劑，將乳劑及血清接種 24孔內之 PK-CL 細胞單層，在 36℃ 3％ CO₂ 暖箱內吸著 2～3 小時，經培養液洗滌一次後，加入內含 2％ FCS 之 EMEM 培養液。繼續培養三天後，以間接螢光（IFA）染色法判讀。
(2)	PCR 診斷：HCV 陽性（方法請參照病歷八）。

五、

診斷：

豬瘟（Hog Cholera）

六、

討論：

　　該病毒株以 PCR 技術偵測結果為野外病毒株，接種家兔亦無熱反應現象，經人工感染試驗結果，可初步得知本野外病毒株非屬強毒株及 LPC 疫苗株，PCR 技術之敏感性及特異性由本試驗已可確定，本所目前已應用於區別豬瘟臨床診斷之用，可迅速診斷疾病及控制疫情。實驗組豬隻 PCD 5 時，中樞神經系統始見輕度非化膿性腦炎病變，其病變出現率自 8.3％至 25％之間；大腦、小腦、延腦及橋腦等病變分佈並無明顯差異性，主要病變以淋巴球圍管、血管內皮細胞增生、血管炎及小神經膠細胞增生等為主徵。

圖1：SPF 豬感染野外豬瘟病毒（S59）第 11 天，膀胱粘膜散發針點狀小出血點。圖2：SPF 豬感染野外豬瘟病毒（S59）第 11 天，淋巴結鬆軟無力，周圍結締組織呈膠樣狀。

圖3：SPF 豬感染野外豬瘟病毒第 12 天，腦組織切片可見顯著非化膿性腦炎病變，腦實質有數個 glial nodules，血管內皮細胞增生及淋巴球圍管現象。圖4：SPF 豬感染野外豬瘟病毒第 7 天，淋巴結中成熟淋巴球顯著減少。