野外豬瘟病毒人工感染 SPF 豬之試驗
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一、 病歷: 5 週齡第二代 SPF 豬行鼻口腔內 (IN & IO) 接種 106.5 TCID50 之 S59 株 PK-CL 細胞增殖第三代豬瘟病毒株,於感染後第五天予以剖檢之,試驗豬臨床上除體溫呈高熱 (41.0℃) 外,無明顯症狀。
豬瘟病毒:S59 ,源自花蓮縣轄養豬場,罹患豬瘟病例二月齡豬隻之肺臟乳劑 ,以 PK-CL 細胞分離所得。該場之疫情如下:
83 年花蓮縣壽豐鄉某一貫化豬場,全場大、小豬隻皆發病,臨床上典型豬瘟徵兆,剖檢亦可見典型豬瘟病變。該場因受提姆颱風侵襲,忙著災後復建, 故 HC 疫苗注射未予施行,約半年後爆發豬瘟。二、 肉眼病變: 1. 脾 : 脾輕度梗塞。 2. 淋巴結: 腸間淋巴呈輕度周邊出血灶且鬆軟無力,周圍結締織呈膠樣狀(圖 2 )。 3. 腎 臟: 腎臟散發點狀出血灶。 4. 膀 胱: 粘膜呈點狀出血(圖 1)。 三、 組織病變: 1. 大 腦: 非化膿性腦炎,腦實質可見輕度淋巴球圍管,血管內皮細胞增生及小神經膠細胞增生等病變(圖 3)。 2. 脾 臟: 局部梗塞,血管內皮細胞增生,脾小結周圍成熟淋巴球顯著減少,而改由網狀內皮細胞所取代。 3. 淋巴結: 成熟淋巴球顯著減少,髓質部可見少量嗜酸性球浸潤(圖 4)。 四、 微生物檢驗: 1.
細菌檢查: 採取病豬之肺、肝、脾、腦及膽囊等臟器於 TSA、Mac Conkey 及 DHL 培養基中培養,結果皆為陰性。 2.
血液檢查:
(1)血球計數:白血球總數為 8500 個 /mm3。
(2)血液抹片:Wright's stain 染色檢查,白血球呈核左轉現象。3.
病毒學檢查: (1) 病毒分離:試驗豬隻之各組織臟器,以含有 2% FCS 之 EMEM 培養液做成 X10 乳劑,將乳劑及血清接種 24孔內之 PK-CL 細胞單層,在 36℃ 3% CO2 暖箱內吸著 2~3 小時,經培養液洗滌一次後,加入內含 2% FCS 之 EMEM 培養液。繼續培養三天後,以間接螢光(IFA)染色法判讀。 (2) PCR 診斷:HCV 陽性(方法請參照病歷八)。 五、 診斷: 豬瘟(Hog Cholera) 六、 討論: 該病毒株以 PCR 技術偵測結果為野外病毒株,接種家兔亦無熱反應現象,經人工感染試驗結果,可初步得知本野外病毒株非屬強毒株及 LPC 疫苗株,PCR 技術之敏感性及特異性由本試驗已可確定,本所目前已應用於區別豬瘟臨床診斷之用,可迅速診斷疾病及控制疫情。實驗組豬隻 PCD 5 時,中樞神經系統始見輕度非化膿性腦炎病變,其病變出現率自 8.3% 至 25% 之間;大腦、小腦、 延腦及橋腦等病變分佈並無明顯差異性,主要病變以淋巴球圍管、血管內皮細 胞增生、血管炎及小神經膠細胞增生等為主徵。