| 1. |
病歷問診 |
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從結核病流行的地區或牧場引進牛隻 |
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| 2. |
臨床檢查
| (1) |
早期疾病無臨床症狀。 |
| (2) |
漸漸消瘦，淋巴結腫大，嚴重病歷則出現咳嗽。 |
| (3) |
臨床上較難證實感染結核病。 |
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| 3. |
酵素結合免疫吸附法 (ELISA)
| (1) |
對於早期感染無診斷上價值，因為早期 M. bovis 抗體力價偏低以及對環境性分枝桿菌的敏感性較高。 |
| (2) |
偵測病例發展的後期或敏感性低的動物較有用。 |
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| 4. |
γ干擾素分析 (IFN-γ)
| (1) |
全血培養於鳥或牛 PPD 或 PBS（無抗原），置於 37°C 中 16 小時。 |
| (2) |
感染牛的淋巴球經激發後會釋放 IFN-γ。 |
| (3) |
血漿樣品收集。 |
| (4) |
使用商品化 ELISA kit (CSL, 澳大利亞)。 |
| (5) |
以其他比較試驗找出反應物。 |
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| 5. |
結核菌素試驗
| (1) |
活體動物診斷結核病的先期試驗。 |
| (2) |
單一皮內試驗。 |
| (3) |
結核菌素 PPD (1mg/ml) 0.1ml 注射於尾根或尾中端皺摺。 |
| (4) |
注射部位先剃毛病檢查無其他病灶。 |
| (5) |
皮膚皺摺以測量器量取兩次 (注射前及注射後 72 小時)。 |
| (6) |
皮膚腫大厚度若有超過 5mm 則被認為是陽性反應。 |
| (7) |
有懷疑的病例則在 60 天後再進行一次試驗。 |
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| 6. |
病理解剖
| (1) |
早期結核病很少在病理解剖時被診斷出。 |
| (2) |
肺結核病灶：所有腹腔器官的漿液膜有乾酪化或鈣化的肉芽腫，最常則見於肺臟或支氣管淋巴結。 |
| (3) |
全身性結核病也可發現腹腔器官的病變。 |
| (4) |
病理解剖的診斷需要組織病理學與細菌學的輔助。 |
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| 7. |
組織病理學觀察
| (1) |
被侵犯的淋巴結與其他器官以 HE、ZN 或 ABC 染色。 |
| (2) |
結節包括上皮細胞與巨細胞。 |
| (3) |
經證實為抗酸菌或含有 M. bovis 抗原。 |
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| 8. |
細菌分離
| (1) |
所有程序都應在安全操作養箱中操作。 |
| (2) |
於抹片上可見抗酸性桿菌。 |
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| 9. |
分離及鑑定
| (1) |
病灶或懷疑的組織經過研磨、抑菌並接種於含有 egg based media 的培養基，如 Lowenstein Jensen、Stonebrink's media；並使用下列培養基增菌，如 pyruvate (無 glycerol)，Herrold egg yolk (無 glycerol)，Ogawa 和/或 Middle-brook7H10 或 7H11 培養基。 |
| (2) |
於 37°C 培養至少 8 週（菌落通常於 3-5 週出現）。 |
| (3) |
分離株的鑑定則根據其培養上與生化特性。 |
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