利用真核系統表現豬第二型環狀病毒ORF 2蛋白
- 作者
- 邱芮瑜; 黃天祥; 王群; 鐘明華; 趙磐華; 郭應誠
- 建立日期
- 97年03月07日
- 更新日期
- 97年03月07日
- 內容
首先萃取台灣豬第二型環狀病毒（porcine circovirus type 2; PCV2）分離株之病毒核酸，然後利用聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR )增幅豬第二型環狀病毒之第二開毒窗（open reading frame 2; ORF2）基因全長片段。再將該基因片段植入表現載體中（pCI-neo），經篩選後，選擇嵌有該基因之重組質體，並將此重組質體轉染（transfect）至真核細胞（PK-15 cell line）內進行重組蛋白表現，並以間接免疫螢光法（indirect immunofluorescence assay, IFA）、聚丙烯醯胺膠片(SDS-PAGE)以及西方轉印法（western blotting）進行分析，可觀察到重組蛋白在真核細胞成功的表現出來。
關鍵詞：豬環狀病毒、間接免疫螢光法、聚丙烯醯胺膠片、西方轉印法