利用即時定量反轉錄聚合酶連鎖反應分析
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摘要
豬瘟是我國重大的動物疾病之一，目前主要以施打疫苗來控制此疾病發生。本所目前生產豬瘟組織培養活毒疫苗，「病毒含有量試驗」的品質管制實驗是利用螢光抗體染色法（immunofluorescence assay, IFA）檢測。本研究旨在縮短品管檢驗期程及提升品管檢驗技術，利用即時定量反轉錄聚合酶連鎖反應（real-time quantitative reversetranscription polymerase chain reaction, qRT-PCR）進行病毒含有量試驗之建立，達到品
質管制檢驗技術之改良。結果顯示即時定量反轉錄聚合酶連鎖反應標準曲線在偵測範圍內病毒含有量與Ct 值都有極佳的線性關係，R2 = 0.9976。標準曲線是由IFA 的50%螢光抗體感染劑量（50% fluorescent antibody infectious dose, FAID50/mL）與qRT-PCR的Ct 值進行線性迴歸分析，以得到迴歸方程式：y = -0.289x + 12.33。y 為FAID50/mL的對數值代表病毒含有量，x 代入所測為樣品Ct 值，即可換算出樣品中之病毒含有量。
故建立FAID50/mL 與Ct 值之線性關係作為標準曲線，可應用於病毒含有量試驗，有效縮短檢驗期程及提升檢驗技術。
關鍵詞：即時定量反轉錄聚合酶連鎖反應、品質管制、疫苗