口蹄疫病毒結構及非結構性蛋白之構築與表現
- 內容
- 本試驗主要針對口蹄疫病毒之結構與非結構性蛋白設計引子，以反轉錄聚合?鏈反應 (RT-PCR）增幅FMDV/O/TAW/97及FMDV/O/TAW/99兩株病毒，增幅之RT-PCR產物以遺傳工程技術嵌入pET表現載體，再將選殖後的重組質體再轉形(Transfermation)至原核大腸桿菌表現系統進行基因表達(Gene expression)，目前已獲得14株基因重組株可表現高產量之口蹄疫病毒重組蛋白。重組蛋白經西方墨點轉漬法 (Western blot assay) 確認可辨識血清中之口蹄疫抗體。目前正進行重組蛋白之大量純化，並預備接種於小白鼠以製備單株抗體。待單株抗體製備完成後將利用免疫色層分析法（Chromatographic strip test）之原理製作Pen-side測試片檢驗套組。開發以體外全血快速檢測法將實際應用於田間之臨床疾病診斷或例行性疾病檢診服務，於現場可作即時檢測以縮短後續動線送樣的時間。