甲殼類白點病病毒檢測方法與動物感染模式之建立
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摘要
白點病病毒 White spot syndrome virus, WSSV 為危害 臺 灣養殖業最重要之 甲殼 類病毒性疾病之一。開發無白點病病毒感染 甲殼類 種原技術為目前業界所需,而在飼料添加抗病毒劑即為其中一種方式,然如何評估其效力則需先建立適當之動物模式。本研究以 PCR 、 Real time PCR 技術先建立偵測 甲殼 類檢體白點病病毒核酸定性及定量方法;以免疫化學染色技術 建立偵測組織內病毒分佈方法,再進一步將以注射及浸泡途徑人工接種 WSSV 病 毒 至白蝦實驗動物 ,建立 白蝦 感染本病模式,作為未來W SSV 種毒生產、動物攻毒及進一步評估抗病毒劑效力之方法。藉由上述所建立之方法,已穩定生產出高濃度且無其他病原汙染之種毒,並建立以注射及浸泡途徑之 白蝦動物感染模式 與 確認其 LD 50 及 LT 50 。藉由免疫化學染色試驗結果顯示,本所製劑 組 先前開發之抗 甲殼 類白點病病毒卵黃抗體對感染 白 蝦組織中 WSSV 抗原具特異免疫結合
活性,未來可供進一步評估此抗體保護 白蝦 抗 WSSV 感染之效力,也可用來開發檢測WSSV 抗原快速檢測試劑之用。
關鍵字:
白點病病毒、聚合 酶 鏈鎖反應、即時定量聚合 酶 鏈鎖反應、免疫化學染色