以酵素連結免疫吸附法(EIA)檢測口蹄疫病毒非結構蛋白抗體
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口蹄疫 (Foot and mouth disease) 為一種急性高傳染性的疾病。病毒屬於小RNA病毒科 (Picornaviridae) 之口瘡病毒屬 (Aphthovirus),共分為七種血清型且有八十種以上之亞型,而各血清型病毒間抗原性差異甚大。台灣現行採用疫苗免疫政策,研究發現口蹄疫病毒之非結構蛋白(Non-structureal protein;NSP)可供鑑別診斷疫苗接種或自然感染之用。惟恐疫苗成份含有殘存之非結構蛋白干擾檢測結果,本試驗針對目前五種 (A、B、C、D、E) 不同來源之市售口蹄疫疫苗,檢測動物體中重覆免疫後產生之抗病毒非結構蛋白抗體之含量,藉以了解非結構蛋白抗體與疫苗使用次數之關係。115頭12週齡肉豬及75隻離乳後3週家兔,分別免疫1~4次並隔週採血供非結構蛋白抗體檢測。檢測方法使用美國UBI (3 B) 及丹麥DVIVR (3AB) 之EIA套組。肉豬結果顯示各廠牌疫苗接種一劑時,以UBI 套組所檢出之最高陽性率:免疫一次(D:4%)、免疫二次(D:10%)、免疫三次(B:50%)、免疫四次(E:30.4%);接種二劑時出現之最高陽性率:免疫三次(D:33.3%)、免疫四次(A:29.6%);以DVIVR套組所出現之最高陽性率:免疫二次(E:2.9%)、免疫三次(C:4.6%);接種二劑時:免疫三次(C:8.3%)、免疫四次(B、D:3.7%)。血清中和抗體測定結果顯示第二週平均力價最高者:接種一劑時,免疫一次(B:67.0X)、免疫二次(D:32.1X)、免疫三次(B:72.4X)、免疫四次(E:91.2X);接種二劑時,免疫三次(B:51.3X)、免疫四次(D:182.0X)。家兔結果顯示各廠牌疫苗接種一劑時,以UBI套組所出現之最高陽性率:免疫二次(F:13.9%)、免疫三次(E:66.7%)、免疫四次(C、E:43.8%);以DVIVR套組所出現之陽性率:免疫一至四次(所有疫苗皆為0%);血清中和抗體測定結果顯示第二週平均力價於接種一劑最高者:免疫一次(D:645.7X)、免疫二次(B:1148.2X)、免疫三次(B:1288.3X)、免疫四次(B:724.4X)。整體而言,不同品系之動物經重覆免疫後發現,UBI套組比DVIVR套組具較高之敏感性,但於免疫三及四次後卻都可產生陽性的NSP抗體反應,然不同疫苗所出現的陽性率與免疫次數沒有明顯相關性。血清中和抗體測定結果顯示五種疫苗中以B、D、E三種疫苗所產生的平均力價最佳。以二種EIA套組檢測田間多次免疫之動物,能否有效地與自然感染作區別診斷,將是決定未來是否可採用此套組做田間大量篩選的依據。