用聚酯纖維載體培養融合瘤細胞株
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單株抗體(monoclonal antibody)技術發展已三十年,在免疫學範疇內已屬常規技術,在其他生命科學領域內的應用也更趨廣泛,目前已不局限在基礎科學研究和生醫檢驗領域範圍內,更有直接臨床治療學上的使用價值。
以塑膠角瓶(T-flask)靜置培養融合瘤細胞所產生的單株抗體量僅約10~100mg/L,遠低於將融合瘤細胞接種BALB/C小鼠腹腔內形成腹水所含單株抗體量產量約1-5g/L。兩者相差50~100倍。因此,目前仍以接種小鼠產生腹水為主要通用方法,以獲得大量高效價單株抗體。但此法需飼養動物,週期長,無法工業化生產;若使用免疫缺陷性小鼠,更需配合「無特殊病原菌動物房」飼養,作業較繁瑣。而最主要問題仍源自社會大眾「動物權利」意識的高張,即「實驗動物使用」的考量。尋找有效的活體外動物細胞培養方法,除可以替代或降低使用動物量,同時又可以簡化抗體純化的過程與降低變異性。本試驗以聚酯纖維載體於500ml吊籃式旋轉瓶進行融合瘤細胞株培養,接種細胞濃度為1x105 cells.ml-1。培養期間分別於第5 、6、7、8日以批次式(Batch)各換液約二分之一。然後,第9日起,採灌注式饋料(perfusion feed)再繼續培養5日後終止實驗,共收集約4公升培養液。以酵素連結免疫分析法(ELISA)檢測抗體濃度,並與角瓶培養法培養三日以上培養液作對照。結果,各階段收集液抗體反應強度為對照組之2~4倍,總產量大於160瓶T175角瓶。由於灌注式培養具有源源不絕之特性,一旦建立最適化條件,可應用於量化製程開發。