建立以即時聚合酶鏈反應技術偵測水禽小病毒
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水禽小病毒感染症 (waterfowl parvovirus infection) 為一高度傳染性與致死性疾病,引起纖維素性與壞死性腸炎,在許多國家都曾發生並造成經濟上的嚴重損失[3]。本病首先被描述於1956 年發生在中國的鵝隻,1981 年由Fang 和Wang 發表[2],之後並經Zheng 等確認為鵝小病毒 (goose parvovirus, GPV)感染[3]。在1960 年代歐洲地區許多國家先後發生鴨、鵝高死亡率之疾病,直至1971 年才由Schettler 證實為小病毒(parvovirus)感染,1978 年再確認並稱之為鵝小病毒[3]。在台灣,首例鵝小病毒感染症病例於1983年被報告[1];此外,於1989 年由正番鴨分離到類似鵝小病毒感染症之另一型病毒,稱為正番鴨小病毒 (Muscovy duck parvovirus; MDPV),MDPV 在宿主性、抗原性及序列上均異於前者。GPV 對鵝及正蕃鴨均有高病原性,主要病徵為腸炎,感染率及死亡率甚高[3];MDPV 對鵝隻並無病原性,然所有鴨品系對MDPV均有感受性,其特徵為病鴨軟腳及癒後發育不良及短嘴,死亡率也高達70 ﹪以上[11]。
水禽小病毒的分離可利用鵝或正番鴨胚胎蛋進行尿囊腔的接種[3],然鵝或正番鴨有一定之繁殖季節,使其胚胎蛋之取得不易;而本病的監測診斷可利用血清學方法,如ELISA、膠體沉澱試驗 (agar gel precipitation test) 或中和試驗[4,10],但是這些方法常無法簡便地進行,且無法達到快速的診斷目的。1980 年代分子生物學的發展提供另一診斷方法,如聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)乃利用偵測病毒專屬的核酸序列達到較為快速的診斷目的[6]。近年更進一步將PCR 技術與核酸產物螢光的偵測結合在一起,稱為即時聚合酶鏈反應(real-time PCR),使得疾病的診斷更為快速且更具敏感性,並可進行其他研究發展[5,8,9]。本計畫即建立以real-time PCR 偵測水禽小病毒核酸,包括GPV 與MD PV,以達到本病之快速診斷。