建立以即時聚合酶鏈反應技術偵測水禽小病毒
- 內容
水禽小病毒感染症 (waterfowl parvovirus infection) 為一高度傳染性與致死性疾病，引起纖維素性與壞死性腸炎，在許多國家都曾發生並造成經濟上的嚴重損失[3]。本病首先被描述於1956 年發生在中國的鵝隻，1981 年由Fang 和Wang 發表[2]，之後並經Zheng 等確認為鵝小病毒 (goose parvovirus, GPV)感染[3]。在1960 年代歐洲地區許多國家先後發生鴨、鵝高死亡率之疾病，直至1971 年才由Schettler 證實為小病毒(parvovirus)感染，1978 年再確認並稱之為鵝小病毒[3]。在台灣，首例鵝小病毒感染症病例於1983年被報告[1];此外，於1989 年由正番鴨分離到類似鵝小病毒感染症之另一型病毒，稱為正番鴨小病毒 (Muscovy duck parvovirus; MDPV)，MDPV 在宿主性、抗原性及序列上均異於前者。GPV 對鵝及正蕃鴨均有高病原性，主要病徵為腸炎，感染率及死亡率甚高[3];MDPV 對鵝隻並無病原性，然所有鴨品系對MDPV均有感受性，其特徵為病鴨軟腳及癒後發育不良及短嘴，死亡率也高達70 ﹪以上[11]。
水禽小病毒的分離可利用鵝或正番鴨胚胎蛋進行尿囊腔的接種[3]，然鵝或正番鴨有一定之繁殖季節，使其胚胎蛋之取得不易；而本病的監測診斷可利用血清學方法，如ELISA、膠體沉澱試驗 (agar gel precipitation test) 或中和試驗[4,10]，但是這些方法常無法簡便地進行，且無法達到快速的診斷目的。1980 年代分子生物學的發展提供另一診斷方法，如聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction, PCR）乃利用偵測病毒專屬的核酸序列達到較為快速的診斷目的[6]。近年更進一步將PCR 技術與核酸產物螢光的偵測結合在一起，稱為即時聚合酶鏈反應（real-time PCR），使得疾病的診斷更為快速且更具敏感性，並可進行其他研究發展[5,8,9]。本計畫即建立以real-time PCR 偵測水禽小病毒核酸，包括GPV 與MD PV，以達到本病之快速診斷。