建立用於檢測新型坦布蘇病毒的即時定量反轉錄聚合酶鏈反應檢測方法
- 英文名稱
- Development of a real-time quantitative RT-PCR assay for the detection of novel Tembusu virus
- 作者
- 陳燕萍*、鄧明中
- 建立日期
- 114年02月20日
- 更新日期
- 114年02月20日
- 內容
摘要
本研究中，我們開發一步式定量即時反轉錄聚合酶鏈反應（quantitative real-time RT-PCR, RT-qPCR）以檢測坦布蘇病毒。根據臺灣坦布蘇病毒NS5基因序列設計引子和探針，用於RT-qPCR擴增119 bp核酸片段。RT-qPCR的檢測極限為20個拷貝數。RT-qPCR的標準曲線涵蓋較寬的範圍（2 × 101～2 × 1010 RNA拷貝數），並表現出高度線性關係，相關係數為0.999。而且，其他重要病原均未被檢出也證實其偵測專一性。此外，RT-qPCR成功檢測臨床樣本中的NS5基因。新開發的RT-qPCR檢測方法表現出良好的偵測極限性和偵測專一性，可提供作為具信賴度、偵測專一性與快速的檢測和定量分析坦布蘇病毒的方法。
關鍵詞：坦布蘇病毒、定量、即時反轉錄聚合酶鏈反應、拷貝數